2022/03/07 PyroSmart NextGen™-你還在用鱟魚試劑偵測內毒素嗎?
從傳統的兔子熱原試驗、到鱟魚血中對於內毒素的凝膠反應測試,無菌製品/藥品的監管與控制已普遍化,全球對於鱟魚血試劑的用量逐年提升,美國鱟試劑大都使用採血並放生的方式,且每年積極投入鱟魚保育,美國鱟數量持續穩定成長,另一來源亞洲鱟的試劑目前則是通過將鱟魚放血致死來製造的,因而成為保育問題及來源穩定性的隱憂。保育的議題重覆浮上檯面,讓世界轉向使用試劑的重組蛋白版本,越來越多廠商重視這一塊,進而開發新型試劑。
PyroSmart NextGen™是一種可持續生產的試劑,原本鱟來源試劑LAL內的Factor C、Factor B及rProclotting enzyme全改為來自基因工程的重組蛋白rFC、rFB及rProclotting enzyme,不會使用到鱟魚的任何一滴血,為Animal free。與傳統LAL具有相同的聯級反應,也因為没有傳統LAL試劑所含的Factor G,完整去除環境中beta-glucan帶來的干擾。與第一代單一重組因子 C (rFC) 產品相比,該創新產品的主要優勢之一是 PyroSmart NextGen® 是天然來源試劑的直接替代品,不需要根據 rFC 重組試劑的要求,更改測試方法和購買新的專業儀器。
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維持原LAL試劑的瀑布式擴大反應,與傳統的動力呈色法一樣,基質的裂解會釋放出黃色的對硝基苯胺(para-nitroaniline,pNA),通過穩定在 37 ± 1ºC 測試過程中的405 nm吸光值變化。當內毒素濃度越高,pNA 釋放越快,從而導致吸光值變化更快。在更快速的總反應時間內(僅約60 min),可達相同的靈敏度:在Microplate reader 為0.005 EU/ml;在PKF儀器上,為0.001 EU/ml。實際測試對於1,3-beta-glucan的反應,X 軸為各濃度加入 200 pg/mL 1,3-beta-glucan的onset time結果、Y 軸為未添加的控制組結果,2者回歸線性非常好,表示1,3-beta-glucan的存在不會造成干擾。
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![jxf吉祥官网总站](/files/圖三 去除環境中干擾 _3_.jpg)
圖三 分別添加、未添加1,3-beta-glucan的PyroSmart NextGen™測試結果,2者回歸線性非常好。
PyroSmart NextGen™是一種可持續生產的試劑,原本鱟來源試劑LAL內的Factor C、Factor B及rProclotting enzyme全改為來自基因工程的重組蛋白rFC、rFB及rProclotting enzyme,不會使用到鱟魚的任何一滴血,為Animal free。與傳統LAL具有相同的聯級反應,也因為没有傳統LAL試劑所含的Factor G,完整去除環境中beta-glucan帶來的干擾。與第一代單一重組因子 C (rFC) 產品相比,該創新產品的主要優勢之一是 PyroSmart NextGen® 是天然來源試劑的直接替代品,不需要根據 rFC 重組試劑的要求,更改測試方法和購買新的專業儀器。
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圖一 PyroSmart NextGen™因為没有傳統LAL試劑所含的Factor G,完整去除環境中beta-glucan帶來的干擾。
維持原LAL試劑的瀑布式擴大反應,與傳統的動力呈色法一樣,基質的裂解會釋放出黃色的對硝基苯胺(para-nitroaniline,pNA),通過穩定在 37 ± 1ºC 測試過程中的405 nm吸光值變化。當內毒素濃度越高,pNA 釋放越快,從而導致吸光值變化更快。在更快速的總反應時間內(僅約60 min),可達相同的靈敏度:在Microplate reader 為0.005 EU/ml;在PKF儀器上,為0.001 EU/ml。實際測試對於1,3-beta-glucan的反應,X 軸為各濃度加入 200 pg/mL 1,3-beta-glucan的onset time結果、Y 軸為未添加的控制組結果,2者回歸線性非常好,表示1,3-beta-glucan的存在不會造成干擾。
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圖二 以Pyros eXpress分析PyroSmart NextGen™對內毒素標準品CSE 50 EU/ml至0.005 EU/ml動力呈色反應。
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圖三 分別添加、未添加1,3-beta-glucan的PyroSmart NextGen™測試結果,2者回歸線性非常好。
PyroSmart NextGen™是任何動力呈色鱟試劑的理想替代試驗,並且因為不具有1,3-beta-glucan干擾的可能性,還可以對現有通過傳統內毒素檢測的樣品進行再評估,實現真實的內毒素檢測,幫助您實現自己的可持續發展目標。更多詳細的介紹與測試結果請洽岑祥當區業務,一起讓鱟魚的未來永續發展!!